服務(wù)熱線
400-021-2200
| 品牌 | HY StemCell/華雅干細(xì)胞 |
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產(chǎn)品英文名稱：HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium
產(chǎn)品中文名稱：人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基
CCGmHuM 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基根據(jù)干細(xì)胞的生長需要，培養(yǎng)基包含必需和非必需氨基酸、維生素、有機(jī)和無機(jī)化合物、激素、生長因子、微量礦物質(zhì)、血清替代物以 及其他補(bǔ)給成分。非常適用于培養(yǎng)哺乳類干細(xì)胞，包括臍帶干細(xì)胞，骨髓干細(xì)胞，脂肪干細(xì)胞等 間充質(zhì)干細(xì)胞。產(chǎn)品嚴(yán)格無菌，無病毒和支原體，性能穩(wěn)定，使用 該培養(yǎng)基能使干細(xì)胞在理想營養(yǎng)平衡狀態(tài)下進(jìn)行多代擴(kuò)增而不發(fā)生分化（至少10代以內(nèi)）。
人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基產(chǎn)品特點(diǎn)：
1.Chemically-Defined
2. Serum-Free
3. Xeno-Free
4.No Plate Coating Necessary
5.Perform Better than FBS Medium
HY Stemcell CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基實驗操作手冊：
1. 材料和試劑準(zhǔn)備
耗材：細(xì)胞培養(yǎng)瓶 corning cellbind flask
25cm2 flask：corning 3289
75cm2 flask：corning 3290
175cm2 flask：corning 3292
試劑：原代人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ,450ml)+Supplement(HZ0203M,50ml)+Adherent factor（HZ0205M ,25X）
*培養(yǎng)基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中；原代培養(yǎng)時需加入1X 的Adherent factor（Adherent factor：*培養(yǎng)基的體積比為1：24比例配制）。
傳代用人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基CCGmHuM Medium（ HZ0201M）：
Basal medium(HZ0202M ，450ml)+Supplement(HZ0203M ，50ml)
*培養(yǎng)基配制：將Supplement在4℃溶解，溶解后將50ml溶液全部加入450ml Basal medium中。
細(xì)胞分離試劑： TrypLE™ Select CTS™（Gibco-A12859-01，100ml）
2. 方法
原代培養(yǎng)（臍帶來源的MSC）
1.1 制備組織細(xì)胞團(tuán)：用手術(shù)器械剝離臍帶血管獲得華通氏膠體，洗凈血細(xì)胞，制備成1-4mm3組織小團(tuán)塊。
1.2 接種：將組織細(xì)胞團(tuán)塊按5-10mg/cm2均勻接種至細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。
1.3 細(xì)胞維持：實時觀察細(xì)胞生長狀況，適當(dāng)換液，待原代細(xì)胞形成的克隆達(dá)到約100個細(xì)胞時，可以進(jìn)行細(xì)胞消化、細(xì)胞凍存或傳代培養(yǎng)。
我們推薦細(xì)胞3-4天換液，原代培養(yǎng)時間大概為9-13天！
細(xì)胞傳代、擴(kuò)增培養(yǎng)
2.1細(xì)胞消化
待細(xì)胞匯合度約75%-80%左右時（9-13天左右），棄掉培養(yǎng)基，用DPBS（w/o Ca2+Mg2+）潤洗一遍，加入適量的細(xì)胞分離液覆蓋細(xì)胞表面，37度，2-5min。待細(xì)胞開始脫落時，用適量的*培養(yǎng)基即刻終止消化，細(xì)胞離 心，300 g，8 min，棄去上清，用*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞沉淀。
2.2細(xì)胞傳代
按1.5-4*103/cm2接種到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，放入二氧化碳恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
我們推薦每3天左右進(jìn)行細(xì)胞傳代培養(yǎng)，判定傳代時間為細(xì)胞在培養(yǎng)
瓶中匯合度約為75%-80%，不能長得過滿!
如果您在使用CCGmHuM TM Human MSCs Growth Medium 人間充質(zhì)干細(xì)胞無血清培養(yǎng)基過程中，有任何技術(shù)問題，我們開通了HY STEMCELL技術(shù)團(tuán)隊，歡迎您發(fā)郵件到pm@hystemcell.com 進(jìn)行交流溝通，我們的目標(biāo)是：推動中國干細(xì)胞技術(shù)走向產(chǎn)業(yè)和臨床！
產(chǎn)品應(yīng)用領(lǐng)域：
適用于人及哺乳類來源的間充質(zhì)干細(xì)胞或成體干細(xì)胞的培養(yǎng)，包括臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞及脂肪干細(xì)胞